E3Switch DE3 Manuel d'utilisateur Page 30

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24
10 x Pfu-Polymerase-Puffer
200 mM Tris/HCl pH 8,8
20 mM MgSO
4
100 mM KCl
100 mM (NH
4
)
2
SO
4
1% Triton X-100
1 mg/ml BSA
I.2 Bakterienstämme
Bakterienstamm Genotyp
E. coli TG-1
lac-pro, thi-1, supE, hsdD5, [F’traD36, pro AB
+
,
lacI
q
, lacZM15]
E. coli BL 21 (DE3) K12 (F
-
hsdS gal ompT r
B
-
, m
B
-
)
I.3 Vektoren
pGEX-2T (Amersham Pharmacia Biotech)
pGEX-2T-GL (Heinrich Flaswinkel)
I.4 Glycerin-Kulturen
Die Glycerin-Kulturen der rekombinanten Proteine RhoA, Rac1, Cdc42, RhoB, RhoC, RhoD,
RhoG, TC10 und RalA, DNT, CNF1 und CNF1
vollständig
waren bereits im Labor vorhanden
und wurden bei -80°C aufbewahrt.
I.5 Radionuklide
[γ−
35
S]GTP
[γ−
32
P]GTP
Die verwendeten Radionuklide wurden von der Firma Hartmann Analytic GmbH,
Braunschweig, bezogen.
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