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C Material und Methoden
I Material
I.1 Puffer, Nährmedien und Antibiotika
Alle Puffer und Medien wurden mit Aqua bidest. angesetzt und autoklaviert. Zur Selektion
transformierter Bakterien wurde zu allen Nährmedien nach dem Abkühlen auf unter 50 °C
Ampicillin in einer Endkonzentration von 50 µg/ml gegeben.
Nährmedien
LB-Medium
10 g Bactotrypton
5 g Hefeextrakt
10 g NaCl
Aqua bidest. ad 1000 ml
LB-Agarplatten 400 ml LB Medium
6,5 g Bacto-Agar
SOC-Medium
10 mM MgSO
4
10 mM MgCl
2
20 mM D-Glucose
in LB-Medium
TSS-Medium
85% v/v LB-Medium
10% v/v Polyethylenglycol
5% v/v Dimethylsulfoxid
50 mM MgCl
2
Puffer
Lysispuffer
A: 50 mM Hepes pH 7,4
2 mM MgCl
2
B: 20 mM Tris/HCl pH 7,4
10 mM NaCl
5 mM MgCl
2
1% Triton X-100
vor Gebrauch zugeben:
DTT (5 mM) und PMSF (1 mM) oder Complete (nach
Angabe des Herstellers)
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